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采用改良的CTAB法,对16个烟草靶斑病菌菌株进行基因组DNA的提取,所得的DNA样品的OD260/OD280值在1.76~1.89之间,电泳主带清晰,无弥散、拖尾现象,DNA质量较高。通过单因素和正交设计结合的方法对影响RAPD~PCR反应的主要因子Mg^2+,dNTP,引物的浓度和模板DNA,Taq酶的用量进行了优化,建立了适宜于病菌的RAPD分子标记的最佳反应体系。优化的反应体系为:模板DNA10ng,Mg^2+浓度3.25mmol/L,dNTP浓度0.175mmol/L,Taq酶1.4U,引物浓度