TLR4^-/- DF1细胞系感染NDV后免疫机制的初步研究

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zxzwo

【摘要】

：

为初步探究鸡TLR4在抗病毒感染天然免疫中发挥的作用,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术针对鸡TLR4基因的功能域,设计、构建了CRISPR/Cas9双质粒表达系统,转染鸡DF1细胞;经

【作者】

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王辉鲁国涛许曼曾为俊邵玉乐赵丽丽陈洪岩刘建华

【机构】

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新疆农业大学动物医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2019年12期

【关键词】

：

TLR4 CRISPR/Cas9系统 DF1 基因敲除 NDV TLR4CRISPR/Cas9DF1gene knockoutNewcastle disease

【基金项目】

：

兽医生物技术国家重点实验室自主研究课题(SKLVBP201801),转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08006-001B)

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为初步探究鸡TLR4在抗病毒感染天然免疫中发挥的作用,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术针对鸡TLR4基因的功能域,设计、构建了CRISPR/Cas9双质粒表达系统,转染鸡DF1细胞;经流式细胞仪分选、测序及western blot鉴定筛选得到TLR4^-/- DF1细胞系;利用新城疫病毒(NDV)感染TLR4^-/- DF1细胞系,采用绝对荧光定量PCR检测NDV拷贝数,相对荧光定量PCR检测TLR4下游接头蛋白、细胞因子及干扰素基因的转录水平。结果显示:与野生型DF1细胞相比,NDV感染6

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