【摘 要】
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目的 建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry,UPLC/Q-TOF-MS)定
【机 构】
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云南省疾病预防控制中心,昆明,650032
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目的 建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(ultra performance liquid chromatography coupled with quadrupole-time of flight mass spectrometry,UPLC/Q-TOF-MS)定性定量检测珠芽瓜叶乌头中毒患者血液、尿液中乌头生物碱及其相关代谢产物.方法 血样经离心后,取上层血清稀释后过0.22μm微孔滤膜;尿样经稀释后过0.22μm微孔滤膜.食物经前处理后,过Oasis MCX 60 mg/3 mL固相萃取小柱,洗脱、吹干、定容,过0.22μm微孔滤膜.草乌块根经匀浆、超声、离心后,取上清液过0.22μm微孔滤膜.所有样品溶液经Aglient SB-C18色谱柱分离后用UPLC-Q-TOF进行测定.结果 14种乌头类生物碱及其代谢产物在1.0～100 ng/mL的浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限在0.1～5.0 ng/mL之间,样品加标回收率为78.9％～116.9％,相对标准偏差为0.5％～4.1％(n=6).2位患者血液中检出苯甲酰乌头原碱、滇乌头碱和草乌甲素,其中苯甲酰乌头原碱未达到定量限,滇乌头碱含量分别为0.18和0.27 mg/L,草乌甲素含量分别为0.25和0.62 mg/L;2位患者尿液中检出苯甲酰乌头原碱、滇乌头碱、草乌甲素,苯甲酰乌头原碱含量分别为0.063和0.055 mg/L,滇乌头碱含量分别为1.66和3.79 mg/L草乌甲素含量分别为2.31和4.89 mg/L,其中一份尿样检出印乌头碱,含量为0.159 mg/L.结论 此方法操作简便、准确度好、能够快速检测检材中乌头类生物碱.珠芽瓜叶乌头含有较高的滇乌头碱和草乌甲素,尿液中乌头生物碱及代谢产物高于血液中产物含量,更适合作为检验材料.
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