【摘 要】
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目的 探讨sCD40基因修饰树突状细胞(DC)对T细胞表型及Th1和Th2类细胞因子分泌的影响及其体外诱导T细胞免疫耐受的机制.方法 分别以sCD40基因及空载体修饰的DC(实验组和对照组
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目的 探讨sCD40基因修饰树突状细胞(DC)对T细胞表型及Th1和Th2类细胞因子分泌的影响及其体外诱导T细胞免疫耐受的机制.方法 分别以sCD40基因及空载体修饰的DC(实验组和对照组)作为刺激细胞,尼龙毛柱法收集Balb/c小鼠淋巴细胞作为反应细胞,初次进行混合淋巴细胞培养(MLC)7 d.在培养的第1、3、4、5、7天时采用新型四唑氮盐(MTS)比色法检测淋巴细胞增殖率;酶联免疫吸附(ELISA)法测定培养液上清中的白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平;第5天采用流式细胞仪检测CD4+、CD8+ T细胞上CD25及CD69的表达.再次进行MLC 5 d,在培养的第1、3、5天时检测与初次MLC相同的项目,并比较初次及再次MLC后的各项检测指标.结果 初次及再次MLC后,实验组(经sCD40基因修饰的DC)刺激细胞增殖反应明显低于对照组(空载体修饰的DC).初次MLC中,实验组CD4+、CD8+ T细胞比例及CD4+ CD25+、CD8+ CD25+、CD4+ CD69+、CD8+ CD69+ T细胞比例明显低于对照组(P＜0.05);实验组和对照组培养液上清中IL-4和IL-10不能测出,而实验组培养液上清中IFN-γ和IL-2的水平均明显低于对照组(P＜0.01).再次MLC后,培养液上清中IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的分泌水平均明显低于对照组(P＜0.01).结论 体外MLC体系中,经sCD40基因修饰的DC可同时作用于CD4+和CD8+ T细胞,使CD69和CD25表达降低,引起T细胞早期活化和成熟障碍,抑制T细胞增殖及Th1和Th2类细胞因子的分泌,诱导出T细胞免疫耐受状态.
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