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构建了猪霍乱沙门氏菌（Salmonella choleraesuis）C500株的crp缺失与插入gfp基因的crp^-/gfp^＋缺失株。首先构建含缺失320bp的crp基因并插入gfp基因的重组自杀性质粒,与C500接合转移,两步法筛选无抗性的crp^-/gfp^＋缺失株,经PCR、测序鉴定和荧光显微镜观察证实在C500的基因组上成功缺失了crp基因并正确插入了gfp基因。