【摘 要】
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为了分析microRNA-23a(miR-23a)对人间充质干细胞(hMSC)体外成骨和软骨形成分化的影响,并考察miR-23a抑制剂的局部给药对难治性骨折的治疗作用.本研究通过使用miR-23a抑制剂
【机 构】
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湖南涉外经济学院体育学院,长沙, 410205;浏阳市骨伤科医院,浏阳,410327
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为了分析microRNA-23a(miR-23a)对人间充质干细胞(hMSC)体外成骨和软骨形成分化的影响,并考察miR-23a抑制剂的局部给药对难治性骨折的治疗作用.本研究通过使用miR-23a抑制剂、miR-23a模拟物及相应的阴性对照转染hMSC.转染14 d后,通过RT-PCR分析了成骨标志物(Runx2,COL2A1和osteocalcin)和软骨形成标记物(COL1A1,aggrecan和SOX9)的mRNA表达.对难治性股骨骨折大鼠的骨折部位局部施用miR-23a抑制剂/miR-23a模拟物及atelocollagen.使用甲苯胺蓝染色进行组织学分析并评估骨折愈合程度.在第2周、第4周和第8周,获得股骨骨折的X光片.通过免疫组织化学评估毛细血管密度.结果显示,体外实验中,随着hMSC的成骨分化,miR-23a的表达显著下降(p＜0.05).抑制miR-23a可以促进hMSC中Runx2、COL2Al、osteocalcin、COL1A1、aggrecan和SOX9的表达,而过表达miR-23a可以抑制上述基因的表达(p＜0.05).体内实验中,miR-23a抑制剂的局部给药明显提高了难治性股骨骨折大鼠的X光评分和骨折愈合评分,并增加了骨折部位的毛细血管密度(p＜0.05).而miR-23a的过表达则可抑制骨折愈合并降低毛细血管密度(p＜0.05).总之,局部施用miR-23a抑制剂可通过增强难治性骨折大鼠的成骨、软骨形成和血管生成来促进骨愈合.
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