猪附红细胞体MSG1基因人工合成、克隆、表达及免疫原性分析

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weige1985
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目的 利用引物重叠扩增法人工合成猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,并检测其免疫原性.方法 将人工合成的猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28c,构建pET28c_msg1表达载体,转入E.coli BL21,IPTG诱导表达.用SDS-PAGE,Western-blot方法分析鉴定,表达产物具有很好的抗原性.纯化后的重组蛋白接种昆明小白鼠后,用重组蛋白作为抗原包被酶标板,以检测接种昆明小白鼠血清抗体的产生.结果 结果表明MSG1基因在大肠杆菌中能够得到高效的表达,并能够刺激小鼠产生较好的抗体.结论 人工成功的合成了猪附红细胞体粘附蛋白基因MSG1,其基因可在大肠杆菌中高效表达,并可刺激小鼠产生较好的抗体.
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