【摘 要】
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本研究建立了一种应用双重PCR结合变性高效液相色谱技术(polymerase chain reaction-denatured high pefformance liquid chromatography,PCR-DHPLC)榆测水稻细菌性谷枯病菌
【机 构】
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湖南出入境检验俭疫局,中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所
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本研究建立了一种应用双重PCR结合变性高效液相色谱技术(polymerase chain reaction-denatured high pefformance liquid chromatography,PCR-DHPLC)榆测水稻细菌性谷枯病菌的方法.根据水稻细菌性谷枯病菌ITS序列(internal tran-scribed spacer)和gyrB基因序列,设计两对特异性PCR检测引物,对水稻细菌性谷枯病菌株和非水稻细菌性谷枯病菌株分别进行PCR-DHPLC及双重PCR-DHPLC检测,同时进行检测灵敏度及阳性菌株的同源性分析.结果显示,PCR-DHPLC检测的特异性强,灵敏度为菌浓度4×102 cfu/mL,7株水稻细菌性谷枯病菌PCR产物同源性一致.该方法能简便、灵敏、高特异性地对水稻细菌性谷枯病菌进行高通量的自动化检测.
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