人干燥综合征A抗原重组体的构建及鉴定

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目的克隆人干燥综合征A抗原基因(SSA-52kD),为SSA抗原的表达和使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSA-52kDcDNA序列,在5’非编码区和3’非编码区设计特异性引物,提取人源Hela细胞总RNA作为模板,反转录RT—PCR扩增人干燥综合征SSA一52kD抗原cDNA。PCR产物纯化后连接至载体PET-30a。导人大肠杆菌DH5α,构建重组质粒PET-30a—SSA-52kD。对重组质粒进行酶切鉴定,选择阳性克隆测序;对DNA测序结果进行鉴定分析。结
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