仙台病毒颗粒数实时荧光定量PCR检测方法的建立及验证

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fenligood
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目的

建立并验证仙台病毒颗粒数的real-time qPCR检测方法。

方法

提取仙台病毒核酸和扩增仙台病毒N基因并构建重组质粒作为参考品,建立TaqMan探针法real-time qPCR方法,并进行线性、重复性、灵敏度和精密度验证。

结果

该方法可以检测到仙台病毒的基因组拷贝数,在1.024 × 103~5 × 1010拷贝数/μl范围内,线性良好,R2>99%;检测样品的加标回收率为84.56% ~119.48%。

结论

与传统的检测颗粒数血凝试验相比,此方法的灵敏度更高,重复性更好,定量准确,可用于以仙台病毒为载体的疫苗颗粒数的检测,进而检测疫苗产品的比滴度。

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