【摘 要】
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为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位（Ure B）蛋白,利用PCR方法扩增出ure B目的基因,将其插入到p ET28a载体中,构建表达质粒p ET28a-ure B。将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌
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为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位（Ure B）蛋白,利用PCR方法扩增出ure B目的基因,将其插入到p ET28a载体中,构建表达质粒p ET28a-ure B。将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌中培养,通过IPTG诱导表达获得Ure B蛋白。采用Q Sepharose High Per formance阴离子交换层析纯化,G-25凝胶过滤层析脱盐,并通过SDS-PAGE和免疫双扩散法对Ure B蛋白进行鉴定。结果表明,该蛋白相对分子质量约为64 k D,与预期结果相符,脱盐后获得的Ure B蛋白纯度
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