稳定表达乙型肝炎病毒X基因肝细胞株的构建

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：LAP281482184

【摘要】

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目的构建稳定表达乙型肝炎病毒x基因（HBVx）的正常人肝细胞株。方法用PCR法扩增含EcoRI和HindⅢ酶切位点的x基因序列，构建HBVx基因真核表达载体pcDNA3．1（＋）-HBVx，转化大肠杆菌DHSct，筛

【作者】

：

谢斌辉王小农刘凤恩钟宝元徐道峰何晓彭宝岗

【机构】

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赣南医学院第一附属医院,中山大学附属第一医院

【出处】

：

山东医药

【发表日期】

：

2010年10期

【关键词】

：

肝细胞乙型肝炎病毒X基因真核表达载体转基因细胞模型 hepatocellular cell hepatitis B virus X gene eukar

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目的构建稳定表达乙型肝炎病毒x基因（HBVx）的正常人肝细胞株。方法用PCR法扩增含EcoRI和HindⅢ酶切位点的x基因序列，构建HBVx基因真核表达载体pcDNA3．1（＋）-HBVx，转化大肠杆菌DHSct，筛选阳性克隆并对其进行双酶切和测序鉴定；用脂质体转染法将HBVx基因导入Chang细胞系，G418筛选，RT-PCR和Westernblot鉴定。结果x基因亚克隆入pcDNA3．1（＋），含有完整的x基因片段，转染后Chang细胞有HBVxmRNA表达，Chang／HBVx有HBVx蛋白的表达

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