【摘 要】
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目的:观察黄芩素对三阴乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231 细胞克隆形成能力的影响,探讨Yes相关蛋白(YAP)在其中的介导作用.方法:黄芩素处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞,噻唑蓝(M
【机 构】
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中国人民解放军陆军第七十四集团军医院,广州510320;复旦大学附属浦东医院,上海200120
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目的:观察黄芩素对三阴乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231 细胞克隆形成能力的影响,探讨Yes相关蛋白(YAP)在其中的介导作用.方法:黄芩素处理MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,免疫荧光法检测细胞YAP的细胞核分布,蛋白免疫印迹法检测细胞YAP大肿瘤抑制因子1(LATS1),YAP,磷酸化Yes相关蛋白(p-YAP)和磷酸化YAP大肿瘤抑制因子1(p-LATS1)蛋白表达水平.结果:与空白组相比,5,10,20 μmol·L-1黄芩素对MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞增殖无明显影响.40,80,160 μmol·L1黄芩素能显著抑制MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞增殖能力(P＜0.01),抑制效应存在一定剂量依赖性.黄芩素对MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(80.3±7.2),(70.4±6.5)μmol·L1.与空白组比较,黄芩素(5,10,20 μmol·L-1)明显剂量依赖性降低MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞克隆形成率(P＜0.05,P＜0.01).与空白组比较,黄芩素(10,20 μmol·L-1)显著剂量依赖性抑制MDA-MB-468 和MDA-MB-231 细胞YAP 细胞核表达(P＜0.01).与空白组比较,黄芩素(5,10,20 μmol·L-1)明显剂量依赖性上调MDA-MB-468细胞p-YAP和p-LATS 1蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);同样,黄芩素(10,20 μmol·L-1)显著剂量依赖性上调MDA-MB-231细胞p-YAP和p-LATS1蛋白表达(P＜0.01).结论:黄芩素可通过介导YAP人核减少,从而抑制三阴乳腺癌MDA-MB-468和MDA-MB-231 细胞克隆形成.
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