目的 探讨丙烯醛调控的糖皮质激素受体(GRs)类小泛素(SUMO)化水平对气道黏液高分泌的影响.方法 构建重组真核表达载体质粒pcDNA3.1-EGFP-flag-SUMO1,酶切电泳鉴定.常规培养16HBE细胞,随机分为9组:A:空白对照组；B:丙烯醛刺激组；C:地塞米松组；D:丙烯醛刺激+地塞米松组；E:SUMO相关修饰物1(SUMO1)转染组；F:空质粒转染组；G:SUMO1转染+丙烯醛刺激组；H:SUMO1转染+丙烯醛刺激+地塞米松组；Ⅰ:空质粒转染+丙烯醛刺激+地塞米松组.每个实验组设5复孔,重复4次实验用于统计学分析.荧光显微镜下观察转染成功率,通过免疫共沉淀以及Western印迹法分析各实验组GRs SUMO化水平的变化,反转录-PCR法比较各实验组中黏蛋白(MUC)5AC转录水平的差异.用酶联免疫吸附法测定细胞培养上清液中MUC5AC的分泌量.结果 B组GRs SUMO化水平(0.079±0.023)低于A组(0.446±0.068)(t=-23.13,P=0.000);D组GRs SUMO化水平(0.574±0.018)低于C组(0.843±0.028)(t=-36.34,P=0.000).H组的MUC5AC mRNA转录水平(0.330±0.063)低于D组(0.617±0.190)(q=-7.80,P=0.000).细胞培养上清液中MUC5AC分泌水平显示,G组与B组差异无统计学意义,而H组[(0.416±0.092) μg/L)]显著低于D组[(0.663±0.104) μg/L]和G组[(0.740±0.343)μg/L](q=-7.31,-9.59;P=0.001,0.000).结论 丙烯醛可下调GRs SUMO化水平,并降低地塞米松对MUC5AC转录的抑制作用。
丙烯醛调控糖皮质激素受体类小泛素化水平对气道黏液高分泌的影响
【摘 要】
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目的 探讨丙烯醛调控的糖皮质激素受体(GRs)类小泛素(SUMO)化水平对气道黏液高分泌的影响.方法 构建重组真核表达载体质粒pcDNA3.1-EGFP-flag-SUMO1,酶切电泳鉴定.常规培养16HBE细胞,随机分为9组:A:空白对照组；B:丙烯醛刺激组；C:地塞米松组；D:丙烯醛刺激+地塞米松组；E:SUMO相关修饰物1(SUMO1)转染组；F:空质粒转染组；G:SUMO1转染+丙烯醛刺激
【机 构】
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400010重庆医科大学附属第二医院,400010重庆医科大学附属第二医院,400010重庆医科大学附属第二医院,俄罗斯医学科学院呼吸生理与病理研究所,俄罗斯医学科学院呼吸生理与病理研究所
【出 处】
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中华医学杂志
【发表日期】
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2012年92期
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