【摘 要】
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目的基因重组人幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)并分析重组蛋白的生物学性质.方法采用PCR从我国临床分离的Hp菌株中克隆UreB基因,并通过DNA重组技术构建非融合表达UreB的
【机 构】
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第三军医大学医学检验系临床微生物学与免疫学教研室,重庆,400038
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);
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目的基因重组人幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)并分析重组蛋白的生物学性质.方法采用PCR从我国临床分离的Hp菌株中克隆UreB基因,并通过DNA重组技术构建非融合表达UreB的重组质粒pET-11C-UreB,转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达.结果重组UreB在大肠杆菌中表达,相对分子质量约62000,表达率26%,N端15个氨基酸序列为MKKISRKEYVSMYGP,肽图及氨基酸组成成分分析结果与理论预测值吻合.以重组UreB免疫BalB/c小鼠,能产生抗UreB抗体.ELISA及Western blotting分析显示,重组UreB具有良好的免疫原性和反应性,表现出与天然HpUreB相似的生物学功能.结论为重组UreB作为Hp亚单位疫苗成分奠定了免疫学基础.
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