小鼠脂联素重组腺相关病毒载体的构建

来源 :中国临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zoevivi

【摘要】

：

目的：构建脂联素重组腺相关病毒载体，为进一步研究脂联素的功能提供基础。方法：实验于2003年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行。以带有小鼠脂联素基因的质粒peDNA3

【作者】

：

张淼李芳萍陈黎红傅静奕严励傅祖植

【机构】

：

贵阳医学院附属医院内分泌科,中山大学附属第二医院内分泌科

【出处】

：

中国临床康复

【发表日期】

：

2006年20期

【关键词】

：

遗传载体腺病毒科/＊遗传学逆转录聚合酶链反应

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目的：构建脂联素重组腺相关病毒载体，为进一步研究脂联素的功能提供基础。方法：实验于2003年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行。以带有小鼠脂联素基因的质粒peDNA3．0-Ad为模板，聚合酶链反应克隆脂联素基因，并将聚合酶链反应扩增产物定向克隆于pAAV-MCS载体，重组AAV-MCS-Ad质粒经双酶切和测序鉴定。随后采用磷酸钙转染法将pAAV-MCS-Ad、pAAV-RC，pAAV-Helper质粒共转染AAV-293细胞，包装得到重组腺相关病毒（rAAV-Ad）。回收病毒原液，采用PEG80

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