格纹鹅膏与滇青冈室内纯共生与室外共生的研究

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鹅膏菌属(Amanita)隶属于担子菌亚门(Basidiomycota)层菌纲(Hymenomycetes)伞菌目(Agaricales)鹅膏菌科(Amanitaceae),其物种多样性是非常丰富的,目前全球已报道近400种。鹅膏菌毒素在细胞生物学、分子生物学、筛选抗菌、抗病毒、抗肿瘤药物等方面有潜在应用。鹅膏属绝大部分为外生菌根菌,在自然状态下与植物共生,是特殊的大型真菌。因其资源珍稀、毒素价值昂贵、难以人工驯化而无法开展可持续性利用。在云南,鹅膏主要与滇青冈共生。滇青冈是滇中高原地区半湿润常绿阔叶林的一个重要代表树种,分布量大。对鹅膏及滇青冈进行生物学关系研究是阐释鹅膏子实体发育机制的重要内容。但在自然环境下,菌根周围生物种类复杂,干扰因素多,难以利用现代技术研究其共生关系。为了更好地研究共生机理必须建立鹅膏与滇青冈的室内共生体系。本文以格纹鹅膏及滇青冈为材料,初步建立了滇青冈的无菌体系及其与格纹鹅膏的纯共生体系。这为丰富及完善外生菌根共生的科学理论,为揭示鹅膏菌根合成、子实体形成机制,为研究鹅膏的半人工或人工驯化栽培等提供新的方向或思路。主要研究内容及结果如下:1.滇青冈无菌体系的建立。以滇青冈种子为材料,进行无菌萌发,取无菌小苗茎段和顶芽诱导愈伤组织。结果表明,茎段诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.05mg/L或MS+TDZ0.70mg/L+IAA1. Omg/L;顶芽诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0. lmg/L或MS+TDZ0.70mg/L+IAA1.5mg/L;愈伤组织增殖培养基为MS+TDZ1.OOmg/L+2,4-D0.3mg/L;在顶芽诱导愈伤组织的同时,项芽会发育成小苗,直接利用小苗进行生根实验,生根培养基为MS+NAA0.10mg/L。2.格纹鹅膏菌丝体与滇青冈愈伤组织纯共生培养。格纹鹅膏菌丝体的优化培养基为:10%绿豆芽+PDA培养基;在共生培养基(菌丝体优化培养基+愈伤组织培养基)上接种菌丝体与愈伤组织,菌丝体在共培养基生长最好。3.格纹鹅膏菌丝体与滇青冈小苗室外共生。将格纹鹅膏菌丝体接种于小苗根部,接种4片菌丝,共接种5次,发现小苗的株高、叶绿素含量及SOD、CAT、POD、ATP等酶活性明显高于其它处理,表明可能形成了菌根。
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