枸杞多糖通过调节肠道菌群改善孕鼠慢性应激导致的子代情绪变化

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[背景]肠道菌群通过脑-肠轴系统影响大脑功能及机体应激反应.肠道菌群和大脑之间的关系对于子代的生长发育尤为重要.[目的]了解孕鼠慢性应激对子代肠道菌群的影响,初步探索枸杞多糖(LBP)对因孕期慢性应激而导致的子鼠情绪改变的改善作用及其可能机制.[方法]选择成年SD大鼠,雌鼠24只,分为对照组、模型组和模型+LBP组,雄鼠20只,分为对照交配组和模型交配组,采用慢性不可预知温和应激建立孕期慢性应激动物模型,并用LBP灌胃干预.子鼠分为对照子鼠组、模型子鼠组和模型+LBP子鼠组.子鼠出生后第20夭,收集新鲜粪便,采用Illumina MiSeq测序技术,测定子鼠粪便中微生物16S rRNAV3-V4区序列,并对群落结构和多样性进行交互分析;在出生后第28天称量体重并内眦静脉采血,采用放射免疫法测定血浆皮质酮水平;在出生后42天利用旷场实验、蔗糖偏好实验以及悬尾实验进行情绪变化的测定.[结果]模型组和模型+LBP组雌鼠在应激第7、14天血浆皮质酮水平分别较对照组升高(P<0.05),提示雌鼠在孕期处于应激状态.LBP干预后,模型+LBP子鼠组体重[(91.92±11.19)g]高于模型子鼠组[(81.06±15.71)g](P<0.05);模型+LBP子鼠组水平运动[(77.47±10.67)分]高于模型子鼠组[(67.32±11.39)分](P<0.05);模型+LBP子鼠组1%蔗糖偏好百分比[(67.00±6.00)%]高于模型子鼠组[(59.00±8.00)%](P<0.05);模型+LBP子鼠组静止时间[(113.39±16.75)s]短于模型子鼠组[(152.13±33.26)s](P<0.05).α多样性分析显示,模型+LBP子鼠组Sobs指数(377.20±30.03)高于模型子鼠组(311.00±11.87) (P<0.05),模型+LBP子鼠组Ace指数(409.38±16.06)高于模型子鼠组(376.33±19.53) (P<0.05);模型+LBP子鼠组厚壁菌门的相对丰度高于模型子鼠组,模型+LBP子鼠组毛螺菌科的相对丰度高于模型子鼠组.反应子鼠情绪的1%蔗糖偏好百分比与肠杆菌科丰度呈正相关(r=0.59),与拟杆菌科丰度呈正相关(r=0.44),与普雷沃氏菌科丰度呈负相关(r=-0.47);静止时间与肽链球菌科丰度呈负相关(r=-0.51);水平运动得分与双歧杆菌科丰度呈负相关(r=-0.48) (P<0.05).[结论]孕期慢性应激不仅导致母体处于较高的应激水平,而且其子代的应激水平也较高.LBP可以缓解孕期慢性应激导致的母体高应激状态,可能对子代肠道菌群的定植和物种的组成及多样性产生积极影响,改善因孕期慢性应激所导致的子鼠情绪变化.
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