载脂蛋白A5启动子片段荧光表达载体的构建及瞬时表达

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goodlyn
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

载脂蛋白家族新成员载脂蛋白A5(apoA5),主要存在于VLDL、HDL及CM中,apoA5基因过表达和基因缺乏小鼠模型研究已为apoA5与TG浓度呈负相关提供直接证据[1].我们通过基因工程方法构建含有apoA5启动子片段的荧光表达载体,瞬时转染人原代肝癌细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测apoA5基因表达。

其他文献
目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)和Janus激酶信号转导及转录激活因子(JAK—STAT)信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。按照随机数字表达分为5组,分别设为sham组、1%二甲基亚砜(DMSO)组、AG490组、BMSCs+1%DMSO移植组、BMSCs+AG490移植组。移植治疗后24h,Wes
期刊
目的 采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1a(HIF-1a)对人膀胱癌细胞株BIU一87增殖、侵袭及转移的影响。方法体外培养BIU-87细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCIt)和Westernblot检测低氧(90%氮气+5%氢气+5%二氧化碳)和常氧下及HIF—lcx—siRNA转染前后BIU-87中HIF-1a、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2
期刊
目的 探讨急性时相蛋白检测在消化系统恶性疾病的临床诊断中的意义.方法 采取酶联免疫吸附试验(ELISA)法进行测定2010年2月到2011年2月间收集的50例消化系统恶性疾病患者(研究组)和同期的50例健康体检对象(对照1组)以及同期的50例消化系统良性疾病患者(对照2组)血清中急性时相蛋白的含量,主要包括C反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(α1-AG)以及α1抗胰蛋白酶(α1-AT)的浓度.
目的 通过对钛表面涂层壳聚糖/PLGA-肝素聚电解质多层膜(CS/PLGA-Hep PEMs)来改善材料的血液相容性.方法 (1)采用双次乳化法制备装载肝素的PLGA纳米粒(PLGA-HepNPs);(2)利用层层自组装技术,在钛表面构建壳聚糖和PLGA-肝素纳米粒聚电解质多层膜;(3)对钛表面涂层进行理化分析;(4)评价该聚电解质多层膜的体外血液相容性.结果 (1)PLGA-肝素自组装形成的聚电
目的 构建带有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)真核表达载体.方法 通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从人外周血淋巴细胞中扩增出骨形态发生蛋白-2 (BMP-2)基因,构建BMP-2基因和报告基因EGFP真核表达载体pIRES2-EGFP-hBMP-2,经PCR、酶切、测序等方法进行鉴定,紫外分光光度计测定质粒浓度及纯度.结果 真核表达载体pIRES
目的 观察右美托咪定对体外循环(CPB)下瓣膜置换术患者脑氧代谢的影响及对脑缺血损伤的保护作用.方法 30例心脏手术患者随机分成A组和B组,每组15例.A组麻醉诱导前给予0.5 μg/kg右美托咪定负荷量,后以0.5 μg/(kg·h)继续泵注维持至手术结束.B组给予0.9%氯化钠输注,其余同A组.分别在T1~T7时点留取桡动脉血和颈内静脉球部血行血气分析,并留血测定血浆S100-β蛋白和神经元特
目的 观察白细胞介素-4(IL-4)和粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)对肿瘤浸润淋巴细胞的体外培养和细胞毒效应的影响.方法 将提取自肿瘤标本的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)设为A、B、C3组,均采用浓度为10%的RPMI 1640培养基,其中C组仅加入浓度为900 U/ml的IL-2,A组在C组基础上加入浓度为900 U/ml的IL-4,B组在C组基础上加入浓度为100 mg/L的GM-CSF,37
目的 观察替米沙坦对双侧输尿管梗阻(BUO)大鼠水电解质紊乱和肾脏水通道蛋白2(AQP2)表达的影响.方法 慕尼黑大鼠36只,随机分为BUO组、替米沙坦组(TEL组)和对照组(Sham组),每组12只.BUO组和TEL组均行双侧输尿管结扎术,Sham组仅游离输尿管但不结扎.TEL组每天TEL液灌胃[5 mg/(kg·d)],BUO组和Sham组同体积生理盐水灌胃.双侧输尿管梗阻24 h后解除梗阻,
慢性胰腺炎(CP)在病理学上表现为腺泡和导管细胞的损害、炎性细胞的浸润及间质的纤维化、胰腺的外分泌功能受损[1-2].Sparmann等[3]报道了在Wister大鼠中应用尾静脉注射二丁基二氯化物(DBTC)可以导致大鼠胰腺早期的炎症及随后的纤维化.本研究旨在观察不同剂量DBTC所致大鼠CP时的一般情况及胰腺病理学等变化,探讨更加稳定的CP动物模型。
期刊
肿瘤干细胞(CSC)是肿瘤的起源,它决定肿瘤发生、发展和复发转移[1].CSC的研究,首先是CSC的分离与鉴定.本研究旨探讨悬浮球培养法分离胃癌CSC细胞的可行性.一、材料与方法1.细胞培养:人胃癌细胞株MKN45(购自上海中国科学院细胞库)在RPMI1640培养液中培养、贴壁以后,收集置于无血清的RPMI 1640培养液96孔超低黏附板中培养,培养液中加入1% N-2添加剂,2% B-27添加剂
期刊