【摘 要】
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目的:探讨HCV-NS5A对PI3K表达的影响.方法:应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得NS5A全长基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中.通过酶
【机 构】
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南京军区军事医学研究所分子生物学研究室
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目的:探讨HCV-NS5A对PI3K表达的影响.方法:应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得NS5A全长基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中.通过酶切、PCR及测序鉴定,NS5A基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞.结果:经RT-PCR及Western blot检测,HCV的NS5A基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组NS5A的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达.结论:NS5A可在体外激活PI3K及其信号通路.
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