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【摘 要】 目的 探讨Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达与各临床及病理指标的相关性。方法 采用Real-time PCR方法检测105例单侧乳腺浸润性导管癌患者组织中Ki-67、ER、PR、HER-2及P53的表达情况；了解Ki-67的表达与年龄、区域淋巴结转移、TNM分期、分化程度、及与ER、PR、HER-2及P53表达的相关性及临床意义。结果 在105例乳腺浸润性导管癌病理组织中，Ki-67高表达比率为62.8%（66/105）；Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达与癌旁组织及乳腺良性肿瘤中的表达之间存在显著性差异（P〈0.05）；Ki-67的表达与肿瘤大小成正相关（P〈0.05），与区域淋巴结转移、组织细胞学分级和HER-2的表达成正相关（P〈0.01）；与ER、PR的表达及分化程度成负相关（P〈0.01）；与患者年龄、P53的表达及TNM分期无明显相关性。结论 Ki-67的表达与乳腺浸润性导管癌的发生发展密切相关，联合检测ER、PR、HER-2及P53的表达能更深入地了解乳腺浸润性导管癌的发展及预后，对临床诊断及治疗具有一定意义。
【关键词】 Ki-67 乳腺浸润性导管癌 临床病理指标 相关性
【中图分类号】 R737.9 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）04-0043-03
乳腺浸润性导管癌是乳腺癌中最常见的病理类型，相对于非浸润性癌其恶性程度、复发率及转移率均较高。手术仍是治疗的主要手段，术后结合放疗及化疗能明显改善患者的预后[1-2]。乳腺浸润性导管癌的发生发展与细胞的异常增殖有关。增殖细胞核抗原Ki-67是一种与增殖细胞相关的核抗原，能够特异地反应肿瘤细胞的增殖活性，因此将其作为乳腺癌预后相关因子[3-4]。我们运用Real-time PCR方法检测105例单侧乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma of the breast， IDC）患者组织中Ki-67、雌激素受体（Estrogen Receptor， ER）、孕激素受体（Progesterone Receptor， PR）、人表皮生长因子受体-2（Human epidermal growth factor receptor-2， HER-2）及抑癌基因（P53）的表达情况，结合临床病理因素分析Ki-67与其相关性，并同时分析Ki-67与患者年龄、肿瘤大小、分化程度、区域淋巴结转移，组织细胞学分级及TNM分期的内在联系及临床意义。
1 材料与方法
1.1 标本
收集江苏省常州市xxx医院2013年1月至2014年6月行单侧乳腺癌根治术患者，且组织病理类型确诊为乳腺浸润性导管癌病理组织105例；及11例良性乳腺疾病术后组织标本。患者均为女性，术前均未经过放疗、化疗及内分泌治疗，年龄区间为29-77岁，中位年龄53岁。其中接受改良根治术99例，保乳术6例。腋窝淋巴结转移55例，无转移患者50例，无远处转移患者。低分化癌48例，中、高分化癌57例。TNM分期Ⅰ期45例，Ⅱ期43例，Ⅲ期17例。
1.2 检测试剂
RNA抽提试剂TRIZOL购自Lifetechnologies公司；氯仿、异丙醇、无水乙醇及DEPC水均购自上海生工生物工程有限公司；该实验所需所有引物均由上海生工生物工程有限公司設计并合成；Real-time PCR所需试剂盒购自大连宝生物有限公司。
1.3 实验方法
取术后病人新鲜组织标本约50mg，于1.5ML无RNA酶 Eppendorf管中，先加入500uL Trizol后用碾磨棒碾碎组织至看不见组织碎块，然后补充Trizol至1ML混匀，加入200uL氯仿，剧烈震摇15秒，冰上静置10分钟，12000rpm离心10分钟后取出，可见液体分三层，汲取上层无色透明液体至另一无RNA酶1.5ML Eppendorf管中，加入500uL预冷的异丙醇，混匀，冰上静置5分钟，10000rpm离心15分钟后取出，可见管底白色絮状沉淀，去上清，管内加入500uL预冷的75%的乙醇，轻轻涡混后7500rpm离心10分钟，去除乙醇后晾干至管底白色絮状沉淀呈现无色透明状，加入20uL DEPC水使得沉淀完全溶解，即为获得的RNA溶液。紫外分光光度计下检测260nm/280nm的比值鉴定纯度，并检测RNA浓度。
依据Real-time PCR试剂盒中的实验方法，使用ABI 7900检测乳腺浸润性导管癌组织及癌旁组织、乳腺良性肿瘤组织中Ki-67、ER、PR、HER-2及P53的表达情况，观察Ki-67与各指标之间的相互关系及临床意义。
1.4 组织分级标准
根据2011年NCCN乳腺癌临床实践指南推荐使用Nottingham联合组织学分级（Nottingham Combined Histology Grade， Scarff-bloom-Richardson分级系统的Elston-Ellis修正版，分为3级）。
1.5 统计学方法
应用SPSS17.0统计软件包进行数据分析。两样本均数比较采用t检验；非正态两独立样本比较采用Wilcoxon秩和检验；2个分类变量之间有无关联性采用χ2检验；2个独立样本等级强度差别采用Wilcoxon秩和检验；多个独立样本比较采用Kruskal-Wallis H检验；Ki-67与ER、PR、HER-2及P53表达关系采用Spearman秩相关检验。检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤Ki-67的表达
与乳腺良性肿瘤组织相比，Ki-67在乳腺浸润性导管癌组织呈现高表达（P〈0.05）（表1），其表达量的高低与肿瘤组织大小具有一定的相关性，肿瘤组织越大其表达量越高（P〈0.05）；在55例腋窝淋巴结转移患者的癌旁组织中表达较良性组织高（P〈0.05），在50例无转移患者的癌旁组织中Ki-67的表达与在乳腺良性肿瘤组织中的表达无统计学差异（P>0.05）（图1）；Ki-67在48例低分化癌中的表达高于其他57例中、高分化癌（P〈0.01）；而其表达量的高低在TNM分期的肿瘤组织之间不具有统计学差异（P>0.05）。（表2） 表1 Ki-67在乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤的表达
Real-time PCR检测了乳腺浸润性导管癌、无淋巴转移癌旁组织、有淋巴转移癌旁组织中Ki-67的表达，与乳腺良性肿瘤相对比，Ki-67在乳腺浸润性导管癌及有淋巴转移癌旁组织中呈现高表达，而无淋巴转移癌旁组织Ki-67的表达水平与乳腺良性肿瘤相当，两者之间无统计学差异。
N=48/57 **：P〈0.01
图1 Ki-67在乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤的表达
2.2 Ki-67的表达与ER、PR、HER-2及P53表达的相关性
我们检测了Ki-67及ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达，研究结果表明，Ki-67的表达与ER、PR的表达成负相关（P〈0.01），与HER-2的表达成正相关（P〈0.01）；与P53的表达无明显相关性（P>0.05）。（图2）
图2. Ki-67及ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达
对比分析Ki-67与ER、PR、HER-2、P53在低分化乳腺浸润性导管癌及中/高分化乳腺浸润性导管癌中的表达差异。如上图所示，在低分化癌组织中，Ki-67、HER-2呈现高表达，而ER、PR呈现低表达，Ki-67的表达与ER、PR成负相关，与HER-2的表达成正相关，具有统计学差异（P〈0.01），与P53之间表达无相关性；在中高分化癌中，Ki-67、HER-2呈现低水平表达，而ER、PR则呈现高表达，Ki-67的表达与ER、PR、亦成负相关，与HER-2成正相关（P〈0.01），同样与P53之间表达无相关性。
2.3 Ki-67的表达与临床病理特征的关系
Ki-67的表达与大部分临床病理指标具有相关性（表2）。即Ki-67的表达与肿瘤大小成正相关（P〈0.05），与区域淋巴结转移、组织细胞学分级成正相关（P〈0.01）；与ER、PR的表达及分化程度成负相关，与HER-2的表达成正相关（P〈0.01）；与P53的表达及TNM分期无明显相关性。
3 讨论
乳腺浸润性导管癌组织中Ki-67的表达水平与临床病理因素存在着密切的联系[5]。Ki-67表达水平越高，肿瘤组织增殖能力越强，淋巴结转移几率越高，分化程度越低，组织分级程度越高，说明Ki-67是乳腺癌发生的重要标志。Ki-67作为一种细胞增殖相关核抗原，表达于G0期以外的所有细胞周期中，于M期处于表达高峰，目前其已成为检测肿瘤增殖活性可靠的指标之一，并在辅助化疗、内分泌治疗疗效预测方面具有一定价值[6-7]。最新研究表明，Ki-67还可作为分子靶向治疗的靶点[8]。
近年来，一系列的研究表明，Ki-67阳性患者的无病生存期和总生存期更短，因此，Ki-67不仅可以作为预后不良的指标，还可以预测内分泌治疗的敏感性[9]。我们通过检测Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达，同时和乳腺良性肿瘤组织中Ki-67相比较，深入分析了乳腺浸润性导管癌组织、有淋巴结轉移的癌旁组织、无淋巴结转移癌旁组织中Ki-67表达的差异，证明其在低分化癌组织中高表达，而在中高分化癌组织中表达低于低分化癌，但仍处于表达增高的状态；同时我们发现，Ki-67在有淋巴结转移的癌旁组织中亦处于表达增高的状态，而在无淋巴结转移的癌旁组织表达量相对较低，这对于患者的预后起到了很好的评估作用。Ki-67作为细胞增殖的指标，同样能够将其作为肿瘤增殖速度及大小的评估指标。
表2 乳腺浸润性导管癌Ki-67的表达与临床病理特征的关系
我们研究表明，乳腺浸润性导管癌组织体积越大，Ki-67的表达越高，表明Ki-67对促进肿瘤细胞增殖起到非常关键的作用。为了观察Ki-67能否预测乳腺浸润性导管癌内分泌治疗的敏感性，我们同时检测了ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达，期望进一步了解Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的相关性。有研究表明，在新辅助内分泌治疗前后，Ki-67表达下降的患者无病生存期延长，提示我们，Ki-67与乳腺浸润性导管癌内分泌治疗相关因子ER、PR、HER-2、P53之间存在着非常密切的联系。因此，我们检测了低分化癌及中、高分化癌中Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的表达，以便通过观察它们的表达水平，进一步了解Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的相互关系。从图2及表2中可以看出，Ki-67与HER-2不论在低分化癌还是中、高分化癌中表达水平较为一致，而ER、PR则与Ki-67的表达呈现相反的趋势，Ki-67、HER-2在低分化癌中表达较高，肿瘤恶性程度较高，ER、PR的表达水平则较低；反之，Ki-67、
HER-2在中、高分化癌中表达较低，肿瘤恶性程度较低，ER、PR的表达水平则较高，提示我们可能通过早期提高患者ER、PR的水平，降低Ki-67的表达，从而抑制肿瘤的增殖及迁移。而上述数据同时也表明Ki-67的表达与P53肿瘤的TNM分级无显著相关性。
乳腺浸润性导管癌为一高异质性疾病，不同分型具有不同生物学特点、复发风险和治疗敏感性。乳腺浸润性导管癌综合治疗方案应根据肿瘤的生物学特性、组织学特征以及患者特点等具体制定，而Ki-67的表达对于乳腺浸润性导管癌的评估及治疗方案的选择具有一定的临床意义。Ki-67作为乳腺浸润性导管癌内在增殖动力指标，其表达水平与肿瘤增殖速度、分化程度、淋巴结转移情况及组织学分级有关；与ER、PR表达程度呈负相关，与HER-2表达呈正相关；而与患者年龄、TNM分级及P53的表达情况无关。因此，通过检测Ki-67的表达，不但能够了解乳腺浸润性导管癌的增殖能力、侵袭性、预后以及对药物的敏感性，同时，对制定综合的乳腺浸润性导管癌个体化治疗方案有较好的参考价值，对临床诊断及治疗具有一定意义。 參考文献
[1]LaPensee E W， Ben-Jonathan N. Novel roles of prolactin and estrogens in breast cancer： resist-ance to chemotherapy [J]. EndocriRelat Cancer， 2010，17（2） ： 91-107.
[2]Sankpal N V，Willman M W，Fleming T P，et al. Transcriptional repression of epithelial cell adhesion molecule contributes to p53 control of breast cancer invasion[J] .Cancer Res， 2009， 69（ 3） ： 753 -7.
[3]Munzone E，Botteri E，Sciandivasci A，et al，. Prognostic value of Ki-67 labeling index in patients with node-negative， triple-negative breast cancer. Breast Cancer Res Treat， 2012， 134： 277-282.
[4]Luporsi E，André F，Spyratos F，et al. Ki-67： level of evidence and methodological considerations for its role in the clinical management of breast cancer： analytical and critical review. Breast Cancer Res Treat， 2012， 132：895-915.
[5]Bhumsuk Keam1， Seock-Ah Im12*.et al.， Ki-67 can be used for further classification of triple negative breast cancer into two subtypes with different response and prognosis. Breast Cancer Research. 2011， 13：R22.
[6] Chalkidou A， Landau DB， Odell EW， Cornelius VR， O'Doherty MJ， Marsden PK. Correlation between Ki-67 immunohistochemistry and 18F-fluorothymidine uptake in patients with cancer： A systematic review and meta-analysis. Eur J Cancer. 2012 Dec， 48（18）：3499-513.
[7]Ahlin C， Fern？ M， Amini RM， Tolockiene E， Blomqvist C， Bergh J， Fj？llskog ML.Ki-67 and cyclin A--prognostic factors in breast cancer. Time to introduce proliferation markers in clinical routine.Lakartidningen. 2010 Mar， 107（10）：672-5.
[8] Kumaki N， Umemura S， Tang X， Saito Y， Suzuki Y， Tokuda Y.Alteration of immunohistochemical biomarkers between pre- and post-chemotherapy： hormone receptors， HER2 and Ki-67. Breast Cancer. 2011 Apr， 18（2）：98-102.
[9]Yerushalmi R， Woods R， Ravdin PM， Hayes MM， Gelmon KA.Ki67 in breast cancer： prognostic and predictive potential.Lancet Oncol. 2010， Feb， 11（2）：174-83.
【关键词】 Ki-67 乳腺浸润性导管癌 临床病理指标 相关性
【中图分类号】 R737.9 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-5160（2014）04-0043-03
乳腺浸润性导管癌是乳腺癌中最常见的病理类型，相对于非浸润性癌其恶性程度、复发率及转移率均较高。手术仍是治疗的主要手段，术后结合放疗及化疗能明显改善患者的预后[1-2]。乳腺浸润性导管癌的发生发展与细胞的异常增殖有关。增殖细胞核抗原Ki-67是一种与增殖细胞相关的核抗原，能够特异地反应肿瘤细胞的增殖活性，因此将其作为乳腺癌预后相关因子[3-4]。我们运用Real-time PCR方法检测105例单侧乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma of the breast， IDC）患者组织中Ki-67、雌激素受体（Estrogen Receptor， ER）、孕激素受体（Progesterone Receptor， PR）、人表皮生长因子受体-2（Human epidermal growth factor receptor-2， HER-2）及抑癌基因（P53）的表达情况，结合临床病理因素分析Ki-67与其相关性，并同时分析Ki-67与患者年龄、肿瘤大小、分化程度、区域淋巴结转移，组织细胞学分级及TNM分期的内在联系及临床意义。
1 材料与方法
1.1 标本
收集江苏省常州市xxx医院2013年1月至2014年6月行单侧乳腺癌根治术患者，且组织病理类型确诊为乳腺浸润性导管癌病理组织105例；及11例良性乳腺疾病术后组织标本。患者均为女性，术前均未经过放疗、化疗及内分泌治疗，年龄区间为29-77岁，中位年龄53岁。其中接受改良根治术99例，保乳术6例。腋窝淋巴结转移55例，无转移患者50例，无远处转移患者。低分化癌48例，中、高分化癌57例。TNM分期Ⅰ期45例，Ⅱ期43例，Ⅲ期17例。
1.2 检测试剂
RNA抽提试剂TRIZOL购自Lifetechnologies公司；氯仿、异丙醇、无水乙醇及DEPC水均购自上海生工生物工程有限公司；该实验所需所有引物均由上海生工生物工程有限公司設计并合成；Real-time PCR所需试剂盒购自大连宝生物有限公司。
1.3 实验方法
取术后病人新鲜组织标本约50mg，于1.5ML无RNA酶 Eppendorf管中，先加入500uL Trizol后用碾磨棒碾碎组织至看不见组织碎块，然后补充Trizol至1ML混匀，加入200uL氯仿，剧烈震摇15秒，冰上静置10分钟，12000rpm离心10分钟后取出，可见液体分三层，汲取上层无色透明液体至另一无RNA酶1.5ML Eppendorf管中，加入500uL预冷的异丙醇，混匀，冰上静置5分钟，10000rpm离心15分钟后取出，可见管底白色絮状沉淀，去上清，管内加入500uL预冷的75%的乙醇，轻轻涡混后7500rpm离心10分钟，去除乙醇后晾干至管底白色絮状沉淀呈现无色透明状，加入20uL DEPC水使得沉淀完全溶解，即为获得的RNA溶液。紫外分光光度计下检测260nm/280nm的比值鉴定纯度，并检测RNA浓度。
依据Real-time PCR试剂盒中的实验方法，使用ABI 7900检测乳腺浸润性导管癌组织及癌旁组织、乳腺良性肿瘤组织中Ki-67、ER、PR、HER-2及P53的表达情况，观察Ki-67与各指标之间的相互关系及临床意义。
1.4 组织分级标准
根据2011年NCCN乳腺癌临床实践指南推荐使用Nottingham联合组织学分级（Nottingham Combined Histology Grade， Scarff-bloom-Richardson分级系统的Elston-Ellis修正版，分为3级）。
1.5 统计学方法
应用SPSS17.0统计软件包进行数据分析。两样本均数比较采用t检验；非正态两独立样本比较采用Wilcoxon秩和检验；2个分类变量之间有无关联性采用χ2检验；2个独立样本等级强度差别采用Wilcoxon秩和检验；多个独立样本比较采用Kruskal-Wallis H检验；Ki-67与ER、PR、HER-2及P53表达关系采用Spearman秩相关检验。检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤Ki-67的表达
与乳腺良性肿瘤组织相比，Ki-67在乳腺浸润性导管癌组织呈现高表达（P〈0.05）（表1），其表达量的高低与肿瘤组织大小具有一定的相关性，肿瘤组织越大其表达量越高（P〈0.05）；在55例腋窝淋巴结转移患者的癌旁组织中表达较良性组织高（P〈0.05），在50例无转移患者的癌旁组织中Ki-67的表达与在乳腺良性肿瘤组织中的表达无统计学差异（P>0.05）（图1）；Ki-67在48例低分化癌中的表达高于其他57例中、高分化癌（P〈0.01）；而其表达量的高低在TNM分期的肿瘤组织之间不具有统计学差异（P>0.05）。（表2） 表1 Ki-67在乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤的表达
Real-time PCR检测了乳腺浸润性导管癌、无淋巴转移癌旁组织、有淋巴转移癌旁组织中Ki-67的表达，与乳腺良性肿瘤相对比，Ki-67在乳腺浸润性导管癌及有淋巴转移癌旁组织中呈现高表达，而无淋巴转移癌旁组织Ki-67的表达水平与乳腺良性肿瘤相当，两者之间无统计学差异。
N=48/57 **：P〈0.01
图1 Ki-67在乳腺浸润性导管癌及癌旁组织、乳腺良性肿瘤的表达
2.2 Ki-67的表达与ER、PR、HER-2及P53表达的相关性
我们检测了Ki-67及ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达，研究结果表明，Ki-67的表达与ER、PR的表达成负相关（P〈0.01），与HER-2的表达成正相关（P〈0.01）；与P53的表达无明显相关性（P>0.05）。（图2）
图2. Ki-67及ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达
对比分析Ki-67与ER、PR、HER-2、P53在低分化乳腺浸润性导管癌及中/高分化乳腺浸润性导管癌中的表达差异。如上图所示，在低分化癌组织中，Ki-67、HER-2呈现高表达，而ER、PR呈现低表达，Ki-67的表达与ER、PR成负相关，与HER-2的表达成正相关，具有统计学差异（P〈0.01），与P53之间表达无相关性；在中高分化癌中，Ki-67、HER-2呈现低水平表达，而ER、PR则呈现高表达，Ki-67的表达与ER、PR、亦成负相关，与HER-2成正相关（P〈0.01），同样与P53之间表达无相关性。
2.3 Ki-67的表达与临床病理特征的关系
Ki-67的表达与大部分临床病理指标具有相关性（表2）。即Ki-67的表达与肿瘤大小成正相关（P〈0.05），与区域淋巴结转移、组织细胞学分级成正相关（P〈0.01）；与ER、PR的表达及分化程度成负相关，与HER-2的表达成正相关（P〈0.01）；与P53的表达及TNM分期无明显相关性。
3 讨论
乳腺浸润性导管癌组织中Ki-67的表达水平与临床病理因素存在着密切的联系[5]。Ki-67表达水平越高，肿瘤组织增殖能力越强，淋巴结转移几率越高，分化程度越低，组织分级程度越高，说明Ki-67是乳腺癌发生的重要标志。Ki-67作为一种细胞增殖相关核抗原，表达于G0期以外的所有细胞周期中，于M期处于表达高峰，目前其已成为检测肿瘤增殖活性可靠的指标之一，并在辅助化疗、内分泌治疗疗效预测方面具有一定价值[6-7]。最新研究表明，Ki-67还可作为分子靶向治疗的靶点[8]。
近年来，一系列的研究表明，Ki-67阳性患者的无病生存期和总生存期更短，因此，Ki-67不仅可以作为预后不良的指标，还可以预测内分泌治疗的敏感性[9]。我们通过检测Ki-67在乳腺浸润性导管癌中的表达，同时和乳腺良性肿瘤组织中Ki-67相比较，深入分析了乳腺浸润性导管癌组织、有淋巴结轉移的癌旁组织、无淋巴结转移癌旁组织中Ki-67表达的差异，证明其在低分化癌组织中高表达，而在中高分化癌组织中表达低于低分化癌，但仍处于表达增高的状态；同时我们发现，Ki-67在有淋巴结转移的癌旁组织中亦处于表达增高的状态，而在无淋巴结转移的癌旁组织表达量相对较低，这对于患者的预后起到了很好的评估作用。Ki-67作为细胞增殖的指标，同样能够将其作为肿瘤增殖速度及大小的评估指标。
表2 乳腺浸润性导管癌Ki-67的表达与临床病理特征的关系
我们研究表明，乳腺浸润性导管癌组织体积越大，Ki-67的表达越高，表明Ki-67对促进肿瘤细胞增殖起到非常关键的作用。为了观察Ki-67能否预测乳腺浸润性导管癌内分泌治疗的敏感性，我们同时检测了ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌中mRNA水平的表达，期望进一步了解Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的相关性。有研究表明，在新辅助内分泌治疗前后，Ki-67表达下降的患者无病生存期延长，提示我们，Ki-67与乳腺浸润性导管癌内分泌治疗相关因子ER、PR、HER-2、P53之间存在着非常密切的联系。因此，我们检测了低分化癌及中、高分化癌中Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的表达，以便通过观察它们的表达水平，进一步了解Ki-67与ER、PR、HER-2、P53的相互关系。从图2及表2中可以看出，Ki-67与HER-2不论在低分化癌还是中、高分化癌中表达水平较为一致，而ER、PR则与Ki-67的表达呈现相反的趋势，Ki-67、HER-2在低分化癌中表达较高，肿瘤恶性程度较高，ER、PR的表达水平则较低；反之，Ki-67、
HER-2在中、高分化癌中表达较低，肿瘤恶性程度较低，ER、PR的表达水平则较高，提示我们可能通过早期提高患者ER、PR的水平，降低Ki-67的表达，从而抑制肿瘤的增殖及迁移。而上述数据同时也表明Ki-67的表达与P53肿瘤的TNM分级无显著相关性。
乳腺浸润性导管癌为一高异质性疾病，不同分型具有不同生物学特点、复发风险和治疗敏感性。乳腺浸润性导管癌综合治疗方案应根据肿瘤的生物学特性、组织学特征以及患者特点等具体制定，而Ki-67的表达对于乳腺浸润性导管癌的评估及治疗方案的选择具有一定的临床意义。Ki-67作为乳腺浸润性导管癌内在增殖动力指标，其表达水平与肿瘤增殖速度、分化程度、淋巴结转移情况及组织学分级有关；与ER、PR表达程度呈负相关，与HER-2表达呈正相关；而与患者年龄、TNM分级及P53的表达情况无关。因此，通过检测Ki-67的表达，不但能够了解乳腺浸润性导管癌的增殖能力、侵袭性、预后以及对药物的敏感性，同时，对制定综合的乳腺浸润性导管癌个体化治疗方案有较好的参考价值，对临床诊断及治疗具有一定意义。 參考文献
[1]LaPensee E W， Ben-Jonathan N. Novel roles of prolactin and estrogens in breast cancer： resist-ance to chemotherapy [J]. EndocriRelat Cancer， 2010，17（2） ： 91-107.
[2]Sankpal N V，Willman M W，Fleming T P，et al. Transcriptional repression of epithelial cell adhesion molecule contributes to p53 control of breast cancer invasion[J] .Cancer Res， 2009， 69（ 3） ： 753 -7.
[3]Munzone E，Botteri E，Sciandivasci A，et al，. Prognostic value of Ki-67 labeling index in patients with node-negative， triple-negative breast cancer. Breast Cancer Res Treat， 2012， 134： 277-282.
[4]Luporsi E，André F，Spyratos F，et al. Ki-67： level of evidence and methodological considerations for its role in the clinical management of breast cancer： analytical and critical review. Breast Cancer Res Treat， 2012， 132：895-915.
[5]Bhumsuk Keam1， Seock-Ah Im12*.et al.， Ki-67 can be used for further classification of triple negative breast cancer into two subtypes with different response and prognosis. Breast Cancer Research. 2011， 13：R22.
[6] Chalkidou A， Landau DB， Odell EW， Cornelius VR， O'Doherty MJ， Marsden PK. Correlation between Ki-67 immunohistochemistry and 18F-fluorothymidine uptake in patients with cancer： A systematic review and meta-analysis. Eur J Cancer. 2012 Dec， 48（18）：3499-513.
[7]Ahlin C， Fern？ M， Amini RM， Tolockiene E， Blomqvist C， Bergh J， Fj？llskog ML.Ki-67 and cyclin A--prognostic factors in breast cancer. Time to introduce proliferation markers in clinical routine.Lakartidningen. 2010 Mar， 107（10）：672-5.
[8] Kumaki N， Umemura S， Tang X， Saito Y， Suzuki Y， Tokuda Y.Alteration of immunohistochemical biomarkers between pre- and post-chemotherapy： hormone receptors， HER2 and Ki-67. Breast Cancer. 2011 Apr， 18（2）：98-102.
[9]Yerushalmi R， Woods R， Ravdin PM， Hayes MM， Gelmon KA.Ki67 in breast cancer： prognostic and predictive potential.Lancet Oncol. 2010， Feb， 11（2）：174-83.