【摘 要】
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[目的]在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌Ag85B蛋白,并对其进行纯化和测定其促人PBMC增殖活性.[方法]将构建的pGEX-Ag85B/BL21活化后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科
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[目的]在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌Ag85B蛋白,并对其进行纯化和测定其促人PBMC增殖活性.[方法]将构建的pGEX-Ag85B/BL21活化后接种于LB培养基中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,包涵体变性后经梯度浓度尿素复性, GST-Sepharose亲和层析、凝血酶切除GST并再次亲和层析纯化;MTT法测定重组Ag85B对人PBMC增殖的促进作用.[结果]成功在大肠杆菌中高效表达出GST/Ag85B融合蛋白,占菌体总蛋白的30%,主要以包涵体形式表达;包涵体复性后经GST-Se
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