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（目的）为建立一种同时检测四种常见动物源致病菌的PCR方法。（方法）本研究针对大肠杆菌的（16 s-23 s rRNA）基因、金黄色葡萄球菌的（nuc）基因、单增李斯特氏杆菌的（hlyA）基因以及沙门氏菌的（invA）基因分别设计合成了四对特异性引物,PCR扩增的目的基因片段分别为662 bp、484 bp、372 bp、284 bp,并对多重PCR反应条件进行了优化。（结果）建立的多重PCR方法具有敏感、特异、准确、快速的优点,检测时间为4h左右。（结论）为研发同时检测人畜共患病食源性主要致病菌即大肠杆