巨噬细胞极化在坏死性小肠结肠炎发病过程中的作用

来源 :中国小儿急救医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yulinfeng93
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目的

探讨巨噬细胞极化在新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)发病过程中的作用。

方法

选用SPF级C57BL/6小鼠建立NEC小鼠模型,将早产小鼠随机分为对照组(n=10)和NEC组(n=19)。对照组小鼠由母鼠母乳喂养,NEC组小鼠给予缺氧、冷刺激、高渗喂养和脂多糖处理。小鼠出生后96 h收集十二指肠下端至结肠部肠道组织。HE染色观察肠道组织形态;FD70灌胃检测肠道屏障功能;免疫荧光检测肠上皮Pan-keratin表达;原位末端转移酶标记(TUNEL)染色检测肠道上皮细胞凋亡;Western blot检测巨噬细胞极化相关指标CD86和CD206的蛋白表达水平;流式细胞术检测肠道M1型、M2型巨噬细胞比例;RT-PCR检测细胞因子粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、IL-12的mRNA表达水平。

结果

与对照组相比,NEC组小鼠存活率显著降低(100.0%比36.8%),肠道组织出现不同等级损伤,肠上皮完整性遭到破坏,肠上皮细胞凋亡增多(1.9%±1.1%比7.6%±2.6%,P

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