27nt-miRNA对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chen6524
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目的:探讨27nt-miRNA(27nt-miR)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HU?VECs)凋亡的影响及分子机制.方法:体外培养HUVECs,分为正常对照组、Ox-LDL组、27nt-miR+Ox-LDL组、anti-27nt-miR+Ox-LDL组和阴性对照+Ox-LDL组.正常对照组给予正常培养;Ox-LDL组用40 mg/L Ox-LDL作用48 h诱导细胞凋亡;27nt-miR+Ox-LDL组、anti-27nt-miR+Ox-LDL组及阴性对照+Ox-LDL组分别以相同的操作方法转染相应慢病毒质粒后用40 mg/L Ox-LDL作用48 h诱导细胞凋亡.采用CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞的迁移能力,caspase-3活性试剂盒检测细胞内caspase-3活性,RT-qPCR法和Western blot法检测细胞内Bcl-2、Bax和caspase-3 mRNA及蛋白的表达情况.结果:与阴性对照+Ox-LDL组相比,27nt-miR+Ox-LDL组HUVECs的27nt-miR高表达可显著降低细胞活力和迁移能力(P<0.05),显著增加Ox-LDL所致的caspase-3活性和细胞凋亡(P<0.05),亦可显著上调Ox-LDL所致的Bax和caspase-3 mRNA和蛋白表达(P<0.05),下调Bcl-2的mRNA和蛋白表达(P<0.05);而anti-27nt-miR+Ox-LDL组,上述所测指标均表现出相反趋势.结论:27nt-miR可能通过调控Bax、cas?pase-3和Bcl-2凋亡/抗凋亡蛋白的表达促进Ox-LDL体外诱导的HUVECs凋亡进而抑制HUVECs活力和迁移.
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