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目的探讨膀胱癌相关蛋白(BLCAP)发挥抑癌功能的分子机制及其在细胞周期信号传导网络中的作用和地位。方法应用分子克隆技术,构建BLCAP真核表达重组质粒pEF—BLCAP~3×Flag,原核表达重组质粒pGEX—KG—BLCAP和pET一32a—BLCAP。应用瞬时转染、RT—PCR和Westernblot检测BLCAP的过表达引起的相关信号分子在mRNA和蛋白水平的表达差异。应用免疫共沉淀和免疫印迹技术检测和确定能与BLCAP相互作用的蛋白分子。采用大肠杆菌体外表达系统,诱导表达并纯化回收BL