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含一定浓度Ca2+的LB培养基,接种大肠杆菌HB101,37 ℃振荡培养至OD600为0.5左右,培养前或培养后加入pBR322质粒,4 ℃放置一段时间后经氨苄青霉素筛选和质粒检测发现,大肠杆菌不经过高Ca2+下的冰浴处理和热激活等过程就能够直接摄取外源DNA;通过对转化子质粒拷贝数和氨苄青霉素抗性测定发现,这种转化方式进入菌体内的质粒DNA同样能够进行有效的复制和表达,与传统的人工转化结果无本质区别;在一定范围内,大肠杆菌的转化频率与环境中的Ca2+浓度成正相关,并且这种准自然条件下的转化需要一定的时间