补肾益元方对运动性低血睾酮大鼠HPA轴的影响及其人参皂苷类成分的含量测定

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目的:采用补肾益元方中药复方对大鼠进行干预,以淫羊藿为阳性对照,探索该方对运动性低血睾酮模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的影响;同时对补肾益元方中人参皂苷类成分(人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rd)的测定。方法:将60只雄性2月龄SD大鼠随机分为对照组(BN)、模型组(SN)、淫羊藿组(SE)、复方低剂量组(SLC)和复方高低剂量组(SHC)。经6周递增负荷跑台运动,采用Elisa检测皮质醇(CORT)、血清睾酮(T)的含量;采用Realtime-PCR、western-blot检测脑组织中CRH、ACTH的mRNA和蛋白表达水平;采用HPLC双波长梯度洗脱测定人参总皂苷的含量。结果:大强度运动后,与BN组比较,SN组ACTH和CRH的mRNA和蛋白表达水平明显上升(P<0.05),而T显著升高(P<0.01);给药后,ACTH和CRH的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),T则显著升高(P<0.01),这可能与激素的脉冲式释放有关。同时人参皂苷类6个成分得到有效分离,根据外标法计算得复方含人参总皂苷为8.02%。结论:补肾益元方能明显改善大鼠ACTH和CRH的mRNA与蛋白表达,进而调控HPA轴作用,维持机体内分泌的平衡,为中药抗运动性低血睾酮提供理论依据。同时该检测方法操作简便,专属性、重复性良好,为补肾益元方的质量标准提供可行的依据。
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