稳定表达膜结合型CD40配体CHO细胞系的建立和鉴定

来源 :中国医药生物技术 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gaoyueeryubing

【摘要】

：

目的建立稳定表达膜结合型CD40配体（CD40L）的CHO细胞系。方法将编码膜结合型CD40L的重组质粒pcDNA3．1-fCD40L用Bg1 Ⅱ和Xho I酶进行双酶切鉴定。电穿孔法向CHO细胞转染该重组质

【作者】

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陈彦于津浦李慧曹水任秀宝

【机构】

：

天津医科大学附属肿瘤医院免疫室/天津市肿瘤防治重点实验室,天津医科大学附属肿瘤医院免疫室/天津市肿瘤防治重点实验室

【出处】

：

中国医药生物技术

【发表日期】

：

2008年1期

【关键词】

：

CD40配体 CHO细胞质粒转染 CD40 ligand CHO cells Plasmids Transfection

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目的建立稳定表达膜结合型CD40配体（CD40L）的CHO细胞系。方法将编码膜结合型CD40L的重组质粒pcDNA3．1-fCD40L用Bg1 Ⅱ和Xho I酶进行双酶切鉴定。电穿孔法向CHO细胞转染该重组质粒，G418筛选抗性克隆，有限稀释法获取单克隆阳性细胞后扩大培养，获得2个整合了fCD40L基因的CHO细胞（CHO-fCD40L）克隆。用RT-PCR、流式细胞仪分别从RNA和蛋白质水平对2个CHO-fCD40L克隆细胞中膜结合型CD40L的表达进行检测；ELISA法检测2个CHO-fCD40L克隆

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