高纯度诊断用乳酸脱氢酶的制备和酶促反应

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设计并优化了植物乳杆菌发酵制备高纯度诊断用乳酸脱氢酶的技术路线. 从培育的厌氧型植物乳杆菌中粗提乳酸脱氢酶制备液,经过DEAE Sepharose F.F.离子交换层析、Phenyl Sepharose 6 F.F.疏水层析及Sephadex G-25 Fine凝胶过滤等方法进行分离纯化,比酶活达1 096.8 U/mg,纯度达88%,纯化倍数达到21.4倍,酶活力回收率为53.9%;高效液相色谱和SDS-PAGE电泳结果显示制得乳酸脱氢酶相对分子质量约为80 000,含有两个亚基,每个亚基分子量约为39
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