桂北五步蛇金属蛋白酶原基因800bp片段的克隆和序列分析

来源 :广西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asd2303690
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目的:扩增桂北五步蛇金属蛋白酶原基因,并对其进行序列分析.方法:从广西桂北山区五步蛇毒腺中抽提蛇毒总RNA,采用一步法(RT-PCR和PCR在同一试管内进行)扩增金属蛋白酶原基因,对其进行电泳检测,得到3条特异的DNA条带,大小分别为1.5kb、1.3kb和800 bp,利用平端连接方法将800 bp克隆至pGEM-T载体,挑选白色菌落,用酶切和PCR法对其进行鉴定.提取阳性菌落进行测序并推导编码的氨基酸序列.结果:信号肽和前肽和已报道的皖南五步蛇金属蛋白酶很相似,同源性为97.9%,但仅含有部分金属蛋白
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