目的提高可溶性抗CD3 scFv片段的表达量，并测定其生物学活性。方法用PCR法致抗CD3 scFv基因突变；用DNA限制性酶切指纹图谱以及Western blot法筛选突变克隆；用间接免疫荧光法测定抗体的特异性结合活性；用125I标记抗体，进行竞争抑制试验；采用51Cr释放试验，进行抗CD3 scFv片段介导的T淋巴细胞细胞毒性测定。结果 DNA序列测定结果表明，抗CD3 scFv抗体突变克隆菌株m2为重链第六位氨基酸突变，即E（GAG）→Q（CAG）。突变后的可溶性抗CD3 scFv片段表达量（1?μg/ml）比突变前(0.01?μg/ml)高100倍。突变前、后的抗CD3 scFv片段与Jurkat细胞（CD3+）的结合特异性未改变。m2能竞争性封闭亲代鼠源性抗体HIT3a与CD3阳性的Jurkat细胞的结合位点。体外杀伤实验结果显示，由m2与IL-2共刺激产生的CD3 AK细胞的细胞毒活性比单用IL-2刺激产生的LAK细胞强。结论通过对抗CD3 scFv抗体基因进行定点突变，实现了该抗体片段的高表达；m2能与CD3+的Jurkat细胞结合；也能激活人外周血中的T淋巴细胞产生CD3AK细胞毒活性。