家蚕BmN细胞S期同步化体系建立

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细胞S期为DNA复制期,探索细胞S期的同步化将为研究各种调控因子对DNA复制、细胞分裂和增殖的影响奠定基础。本研究以家蚕BmN细胞为研究对象,采用脱氧胸苷(TdR)双阻断、脱氧胸苷-诺考达唑(TdR-Nocodazole)双阻断及羟基脲(HU)法,探索BmN细胞S期同步化的最佳体系。结果发现,TdR双阻断法处理对BmN细胞S期的同步化效率为67.2%,TdR-Nocodazole双阻断法处理为69.7%,HU处理对S期同步化效果最好,达90%以上。进一步对HU处理后不同释放时间点的细胞进行研究发现,1 mmol/mL HU处理后释放7 h时BmN细胞S期同步化效率最高,达94.9%。通过不同处理方法研究家蚕BmN细胞的S期同步化效果,发现1 mmol/mL的HU处理16 h,然后于正常培养基中释放7 h,可有效的将BmN细胞同步化在S期,且该处理方法简单,易于操作。
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