【摘 要】
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目的在于构建棉花GhEPSPS基因的原核表达载体,并在宿主大肠杆菌中成功诱导表达。利用RT-PCR技术从陆地棉苏棉18中克隆获得GhEPSPS基因的开放阅读框序列,连接到p EASY-Blunt平
【机 构】
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江苏省农业科学院经济作物研究所/农业部长江下游棉花和油菜重点实验室,国家棉花工程技术研究中心,江苏沿江地区农业科学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金（31301682）, 江苏省农业科技自主创新基金（CX（14）5009）, 国家转基因重大专项（2011ZX08005-001）, 国家科技支撑计划课题（2014BAD11B02）
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目的在于构建棉花GhEPSPS基因的原核表达载体,并在宿主大肠杆菌中成功诱导表达。利用RT-PCR技术从陆地棉苏棉18中克隆获得GhEPSPS基因的开放阅读框序列,连接到p EASY-Blunt平端载体,构建获得重组载体p EASY-Blunt-GhEPSPS;以该重组载体为模板,PCR获得两端含有Eco RⅠ和XhoⅠ酶切位点的GhEPSPS基因CDS序列,通过这2个酶切位点插入到p ET32a载体,构建获得原核表达重组载体p ET32a-GhEPSPS,转化到宿主菌株BL21（DE3）中,经IPTG诱
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