叠氮溴乙锭-环介导等温扩增法快速检测空肠弯曲菌活菌

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目的 建立叠氮溴乙锭(ethidium monoazide bromide,EMA)-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测空肠弯曲菌活菌的方法.方法 以空肠弯曲菌mapA基因为检测靶基因,纯培养物提取模板进行LAMP反应,检测空肠弯曲菌LAMP灵敏度、EMA曝光照射时间试验和使用浓度试验.结果 空肠弯曲菌LAMP检测灵敏度为800 CFU/mL;曝光照射时间为5 min;EMA终浓度50μg/mL以下时不会抑制空肠弯曲菌活菌的DNA扩增,终浓度为1μg/mL EMA能有效抑制4×104 CFU/mL空肠弯曲菌死菌扩增;1%活菌混合体系中EMA-LAMP检测结果为阳性.结论 EMA-LAMP方法能有效快速检测空肠弯曲菌活菌.
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