聚合酶链反应技术检测血液中布鲁氏菌DNA研究

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将PCR技术应用于血液中布鲁氏菌DNA检测[1]. 1.材料与方法:①根据Bp26基因片段设计的引物序列为:Bp26-f:5'-ACCATGAACACTCGTGCTAGCAA-3';Bp26-r:5'-TCATTACTTGATTTCAAAAACGACA-3'.②菌株:布鲁氏菌S2及M16菌株和大肠埃希菌DH5α菌株.③基因组提取及酶切:采取从布鲁氏菌活菌提取S2及M16总基因组[2],PCR扩增Bp26基因片段,扩增产物与PRT-TK和pBluescriptⅡKS+质粒连接,转化到DH5α感受态细胞,克隆并制备质粒,用XhoⅠ和EcoRⅠ内切酶酶切.
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