【摘 要】
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构建血脑屏障微流控芯片模型, 应用于中药活性成分跨血脑屏障渗透性研究。该芯片模型由垂直交叉的两层通道及单层聚碳酸酯膜组成, 采用原代人脑微血管内皮细胞, 并能模拟血管剪切应力。通过活/死细胞染色和免疫荧光染色观察芯片上细胞生长状态, 细胞生长状态良好, 且在动态培养下细胞间黏附连接蛋白结构完整;考察该芯片模型对荧光示踪剂和3种模型药物的渗透性和P-糖蛋白 (P-gp)的表达情况, 结果显示荧光示踪
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81872829,81673386,82173777);
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构建血脑屏障微流控芯片模型, 应用于中药活性成分跨血脑屏障渗透性研究。该芯片模型由垂直交叉的两层通道及单层聚碳酸酯膜组成, 采用原代人脑微血管内皮细胞, 并能模拟血管剪切应力。通过活/死细胞染色和免疫荧光染色观察芯片上细胞生长状态, 细胞生长状态良好, 且在动态培养下细胞间黏附连接蛋白结构完整;考察该芯片模型对荧光示踪剂和3种模型药物的渗透性和P-糖蛋白 (P-gp)的表达情况, 结果显示荧光示踪剂和模型药物的渗透性与文献报道一致, 芯片上P-gp表达和功能正常, 表明该血脑屏障芯片模型具有完整的结构和功能。将构建成功的芯片模型应用于6种中药活性成分跨血脑屏障渗透性评价, 采用HPLC-MS/MS法测定跨膜转运液中的药物浓度, 获得各成分的Papp结果。延胡索甲素Papp为 (4.51±1.90)×10-7 cm·s-1、延胡索乙素Papp为 (9.10±6.59)×10-7 cm·s-1、欧前胡素Papp为 (9.38±2.53)×10-7 cm·s-1, 而异欧前胡素、黄芩苷和绿原酸浓度低于定量限, 推测其在芯片模型上渗透性较低。本研究成功构建血脑屏障微流控芯片模型, 屏障功能更加完善且更接近生理环境, 有望作为一种新的体外药物渗透性评价工具。
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