鼠疫耶尔森菌多种耐药基因PCR检测方法的建立与应用

来源 :中华地方病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bisha1007
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目的

利用聚合酶链式反应(PCR)技术,建立鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)多种耐药基因的检测方法,为鼠疫的治疗提供指导性建议。

方法

根据美国国立生物信息中心(NCBI)公布的耐氨基糖苷类链霉素strA、strB基因、耐β-内酰胺类抗菌药物tem、shv、ctx-m基因,耐磺胺类药物sul1、sul2、sul3基因序列,分别对每个基因设计1对引物,对282株分离自青海省鼠疫自然疫源地鼠疫菌的DNA进行PCR扩增,扩增产物进行凝胶电泳,用凝胶成像系统拍照后读取结果。对282株菌株进行链霉素、磺胺甲恶唑、头孢曲松钠3种药物的耐药性检测。

结果

282株菌株的PCR扩增结果均为阴性,尚未发现具有链霉素、磺胺类药及β-内酰胺类抗菌药抗药基因的菌株。药敏试验显示,282株菌株对链霉素、磺胺甲恶唑、头孢曲松钠均高度敏感。抑菌环直径分别> 19、17、21 mm。

结论

利用PCR技术作为鼠疫菌多种耐药基因的检测方法是可行的,应用该方法能系统监测大批量鼠疫菌的耐药基因是高效、经济、实用的实验方法,能为鼠疫治疗提供指导性建议。

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