柯萨奇B3病毒结构和非结构蛋白基因重组质粒的构建及其在体外真核细胞中的

来源 :微生物学免疫学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yufengdong

【摘要】

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【作者】

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王灵枢朱莉

【机构】

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上海第二医科大学

【出处】

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微生物学免疫学进展

【发表日期】

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2000年4期

【关键词】

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柯萨奇病毒B3 DNA疫苗质粒表达 coxsackievirus group B DNA vaccines plasmid expression

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制备ＣＶＢ３结构蛋白和非结构蛋白重组质粒ＤＮＡ疫苗时，采用ＲＴ－ＰＣＲ从ＣＶＢ感染的ＨｅＬａ细胞中扩增ＶＰ１、ＶＰ２、２Ａ和３Ｄ基因，重组入真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３中，构建ｐｃＤＮＡ３／ＶＰ２、ｐｃＤＮＡ３／ＶＰ１、ｐｃＤＮＡ３／２Ａ和ｐｃＤＮＡ３／３Ｄ重组质粒，经酶切和测下实扩增的序列并将各重组质粒体外转染真核细胞ＣＯＳ－７，用ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍＲＮＡ的转录，用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测表达产物。结果４种重组质粒酶切出相应大小的目的片段，经测序证实为ＣＶＢ３相应序列，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ证实能够在

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