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目的 探讨人双突变的二氢叶酸还原酶（DHFR）基因对小鼠化疗保护作用。方法 以反转录病毒为载体，将DHFR基因转染入小鼠骨髓干细胞，观察氨甲喋呤（MTX）处理后的骨髓细胞中粒细胞-巨噬细胞克隆形成单位（CFU-GM）的生成情况；观察大剂量MTX化疗后转基因小鼠血象、体重及生存率的变化；用RT-PCR检测转基因小鼠骨髓细胞耐药基因的表达。结果 转染SFG-F／S-NeoR耐药基因的骨髓细胞有耐药克隆的形成，供体小鼠为15.8％，受体小鼠为18．0％，对照组为0；大剂量化疗后，含耐药基因组小鼠血象、体重逐渐恢复正常，生存率为83．3％（第40天），对照组为0；转基因小鼠骨髓细胞经RT-PCR检测，显示有F／S基因条带（400bp）。结论 DHFR耐药基因可导入小鼠骨髓细胞并获得表达，提高了骨髓细胞对MTX的耐药性。