pCDM8—GFP报告载体的构建及鉴定

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:WRYJL2001
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实验资料 pDM8-PBL cDNA文库由Jackson博士惠赠,pEGFP-N3真核表达载体购自Clontech公司.Not I、Hind Ⅲ和T4 DNA连接酶购自大连宝生物公司.COS7细胞为本室冻存.pCDM8-GFP载体的构建方法参照文献.提取pCDM8-X(X表示载体中插入的未知cDNA片段)和pEGFP-N3质粒,分别用Not I和Hind Ⅲ进行双酶切,回收酶切片段,用T4连接酶进行连接,转化感受态宿主菌.挑单菌落培养,提取质粒用Not I和Hind Ⅲ双酶切进行阳性克隆鉴定.提取重组pC
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