肝细胞癌组织中HBx基因缺失型突变体真核表达载体的构建和鉴定

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目的构建缺失型突变体HBx—d382和HBx—d431真核表达载体。方法以pGM—T/HBx—d382和pGM-T/HBx-d431质粒为模板,PCR扩增含Kpn I和Apa I酶切位点的HBx基因片段。双酶切后再与载体pcDNA3载体重组连接。重组质粒转化到大肠杆菌DH5α后,经酶切鉴定和DNA序列测定,筛选出重组pcDNA3/HBx—d382和pcDNA3/HBx—d431真核表达载体。结果成功构建了重组pcDNA3/HBx—d382和pcDNA3/HBx-d431真核表达载体,经DNA序列测定与比对
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