致病性迟钝爱德华氏菌毒力基因的PCR检测

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为了筛选可用于检测致病性迟钝爱德华氏菌的毒力基因,最终建立致病性迟钝爱德华氏菌PCR检测体系,根据致病性迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda,E.et w.)PPD130/91分离株的6个毒力基因citC、fimA、gadB、katB、mukF、esrB序列,设计了6对引物,进行PCR扩增、引物灵敏度试验及特异性试验。结果显示:在国内分离的3个致病株中同时出现citC、fimA、gadB、mukF4个毒力基因,而katB和esrB毒力基因未出现。各毒力基因单重PCR灵敏度试验中,gadB基因可检测到的模板量为1pg,其余3个毒力基因可检测到的模板量为100pg。在特异性试验中,11株常见致病菌没有扩增出与目的基因大小相近的片段,引物特异性良好。由此推断,citC、fimA、gadB、mukF4个毒力基因中的任意一个,均可作为检测致病性迟钝爱德华氏菌的标志物,但此结论还有待于更多国内分离株的验证。
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