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为构建表达猪流行性腹泻病毒（PEDV）S蛋白复制型重组人腺病毒4型（HAdV-4）及评价其免疫原性，本研究利用RT-PCR扩增得到PEDV中国变异株纤突（s）基N的N-末端区域（1bp～1140bp），构建重组质粒pAd4FAST-Shuttle-S，重组质粒经线性化和同源重组，得到含有PEDVS基因的重组HAdV．4感染性克隆，纯化的感染性克隆DNA经PacI线性化后转染HEK293细胞，拯救得到表达PEDV变异株S蛋白的重组病毒rAd4△E3-S。将该重组病毒免疫小鼠，间接ELISA测定其血清中抗S蛋