柯萨奇病毒B4 2B基因siRNA表达载体的构建及其对柯萨奇病毒B4抑制作用的研究

来源 :中国实验诊断学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：anan0508

【摘要】

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目的构建针对柯萨奇病毒B42B基因的siRNA表达载体并检测该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒B4的抑制作用。方法选择柯萨奇病毒B4的2B基因区21bp的基因片段作为靶序列，合成含

【作者】

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史红艳周密陈佳玉王朝飞李凡

【机构】

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吉林大学基础医学院病原生物学教研室

【出处】

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中国实验诊断学

【发表日期】

：

2006年1期

【关键词】

：

哥萨奇病毒 SIRNA 转染 coxsackie B4 virus siRNAvector

【基金项目】

：

吉林大学创新基金资助项目（编号2002CX107）,本实验亦为与美国FDA肠道疾病与性传播疾病预防与控制实验室徐德启教授合作项目.

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目的构建针对柯萨奇病毒B42B基因的siRNA表达载体并检测该载体在体外培养细胞中对柯萨奇病毒B4的抑制作用。方法选择柯萨奇病毒B4的2B基因区21bp的基因片段作为靶序列，合成含有靶序列的DNA片段并克隆到pGCai-U6／Neo／GFP／siNeGative载体中，构建pGCsi-U6／Neo／GFP／2B，使其可表达具有发夹结构的双链siRNA，在转染该载体后用柯萨奇病毒B4攻击Hela细胞，检测该载体对病毒感染细胞的保护效应。结果通过酶切、电泳、序列分析及荧光显微镜观察证明载体构建成功，而且DGC

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