【摘 要】
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目的研究诺如病毒衣壳蛋白在酵母细胞中的表达。方法 2013年3—11月收集病毒性腹泻患者粪便标本。将GII-4型诺如病毒的衣壳蛋白序列克隆到pPICZ A载体中。然后将重组的pPICZ
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目的研究诺如病毒衣壳蛋白在酵母细胞中的表达。方法 2013年3—11月收集病毒性腹泻患者粪便标本。将GII-4型诺如病毒的衣壳蛋白序列克隆到pPICZ A载体中。然后将重组的pPICZ A-NV4质粒转化到毕氏酵母中进行蛋白表达。并采用western blot和电镜方法鉴定表达产物。结果除未诱导(0 h)外,其他诱导的时间下均检测到预期的衣壳蛋白(58kDa),并且蛋白表达量随诱导时间有递增趋势,在72 h达到高峰,96 h表达量略有下降。空白对照(未含有衣壳蛋白序列的Pichia pastoris)的Pichia pastoris(诱导72 h)未检测到相应的杂交信号。在Pichia pastoris中表达出诺如病毒的衣壳蛋白,呈病毒颗粒状,直径为30 nm左右。结论成功表达出颗粒状的衣壳蛋白,为进一步开发诺如病毒的快速检测试剂盒和疫苗的研究奠定了基础。
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