【摘 要】
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目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican3,GPC3）N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶（GST）重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3
【机 构】
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南通大学附属医院消化病研究室,中国科学院上海神经科学研究所
【基金项目】
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南通市社会发展计划项目（S7943）.
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目的构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican3,GPC3）N端蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶（GST）重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达及纯化。方法以重组质粒pcDNA3.1-GPC3N为模板,扩增GPC3 N端基因,产物经纯化回收后与载体PGEX-4T-1连接并转化大肠埃希菌Rosetta,酶切鉴定序列完全正确者诱导表达GST-GPC3 N端融合蛋白,并以谷胱甘肽琼脂糖小珠亲和纯化。结果Glypican 3 N端基因片段成功插入载体PGEX-4T-1,插入位点及碱基序列完全正确,转化Rosetta后,
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