TIGAR基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的作用初探

来源 :诊断学理论与实践 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wudingyong2009
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目的:构建TP53诱导的糖酵解和凋亡调控子(T1GAR)全长cDNA的真核表达载体pEGFP—TIGAR,观察TIGAR存人肝细胞HepG2中的作用:方法:RT-PCR技术扩增获得TIGAR全长cDNA,将扩增的产物克隆,经酶切、DNA测序鉴定正确.构成pEGFP—TIGAR的真核表达重组质粒:利用脂质体将重组质粒转染入HepG2细胞,流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞周期、MIB-1(Ki-67抗原测定)法检测细胞增殖、实时荧光PCR检测mRNA表达和Westem-blot检测蛋白
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