用高分辨率熔解曲线做PCR条件优化

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目的:确定高分辨率熔解曲线分析方法可用于PCR条件优化。方法:对家蝇抗性基因cyp6d1和kdr进行温度梯度PCR,其产物分别使用高分辨率熔解曲线分析和溴化乙锭琼脂糖凝胶电泳方法判定最佳退火温度,并将结果进行比较分析。结果:根据高分辨率熔解曲线判定cyp6d1和kdr基因的最佳退火温度分别为65℃和63.8℃,与根据溴化乙锭琼脂糖凝胶电泳判定的退火温度相同。结论:可用高分辨率熔解曲线判断PCR最佳退火温度。
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