【摘 要】
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目的:采用miR-122过表达/干扰表达慢病毒质粒干预HBV稳转优势单克隆株HepGA14,观察其乙肝表面抗原(HB-sAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA (HBV DNA)表达功能的变化.方法:构建miR-122过表达和干扰表达慢病毒质粒,以最佳感染复数MOI值侵染HBV全基因组1.3倍体HBV稳转优势单克隆株HepGA14(对照组),分别命名为HepGA14-VL1044(miR122过表达组)和HepGA 14-VL 1043 (miR 122干扰组).qPCR检测HepG2和HepG
【机 构】
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广西医科大学附属肿瘤医院,南宁530021
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目的:采用miR-122过表达/干扰表达慢病毒质粒干预HBV稳转优势单克隆株HepGA14,观察其乙肝表面抗原(HB-sAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA (HBV DNA)表达功能的变化.方法:构建miR-122过表达和干扰表达慢病毒质粒,以最佳感染复数MOI值侵染HBV全基因组1.3倍体HBV稳转优势单克隆株HepGA14(对照组),分别命名为HepGA14-VL1044(miR122过表达组)和HepGA 14-VL 1043 (miR 122干扰组).qPCR检测HepG2和HepGA14中的中miR-122的表达情况.ELISA分别检测3组细胞中上清HBsAg和HBeAg表达量,qPCR检测3组细胞的HBV DNA和miR-122表达水平.结果:最佳MOI值为30.与对照组比较,过表达miR-122慢病毒质粒侵染HepGA14后可上调优势细胞株内miR-122表达量,下调HBV DNA复制活性及HBsAg、 HBeAg的表达量;干扰miR-122表达后,可上调HepGA14的HBV DNA复制活性及HBsAg、HBeAg的表达量,差异均有统计学意义(均P<0.0001).结论:成功构建miR-122慢病毒过表达/干扰载体,并建立稳定过表达/干扰miR-122的HepGA14细胞系;miR-122可调控HBsAg、HBeAg、HBV-DNA的表达水平.
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